ATIVIDADE 2 - BIO - ENGENHARIA GENÉTICA - 52_2025

ATIVIDADE 2 – BIO – ENGENHARIA GENÉTICA – 52_2025
Período:	26/05/2025 08:00 a 06/07/2025 23:59 (Horário de Brasília)
Status:	ABERTO
Nota máxima:	0,50
Gabarito:	Gabarito será liberado no dia 07/07/2025 00:00 (Horário de Brasília)
Nota obtida:

1ª QUESTÃO

Na Coreia do Sul, pela primeira vez, dois cães da raça beagle nasceram a partir de células de pele clonadas e alteradas por edição genética (CRISPR). A esperança dos cientistas envolvidos no trabalho é de que sua técnica possa ser usada para eliminar mutações causadoras de doenças em animais com pedigree. Apesar de cachorros já terem nascido anteriormente editando a genética de ovos fertilizados, esta é a primeira vez que se usa a técnica em células clonadas. A novidade é benéfica porque significa que as mutações podem ser removidas sem afetar outras características, como acontece na edição de genes de óvulos.

Beagles são clonados em técnica inédita para tentar driblar doenças. Disponível em: <https://vidadebicho.globo.com/comportamento/noticia/2022/07/beagles-sao-clonados-em-tecnica-inedita-para-tentar-driblar-doencas.ghtml>. Acesso em: 11 abr. 2024.

Considerando o texto apresentado e com os conhecimentos sobre a Clonagem Gênica, avalie as afirmações a seguir.

I. A escolha do vetor de clonagem é de suma importância, pois o DNA inserido precisará ser multiplicado com facilidade.
II. Para o isolamento do genoma de interesse, é utilizado a enzima ligase para selecionar apenas os fragmentos contendo a informação da expressão que será introduzida no vetor.
III. A enzima de restrição atuará apenas no vetor, cortando o local onde o gene será inserido.
IV. Para o sucesso da clonagem gênica, é de suma importância conter um vetor de clonagem, o gene de interesse e as enzimas ligase e de restrição.
‌
É correto o que se afirma em:

ALTERNATIVAS

	I, apenas.
	II, apenas.
	I e IV, apenas.
	II e III, apenas.
	I, II e III.

2ª QUESTÃO

A origem da palavra eletroforese vem da língua grega, e é resultante da junção do sufixo “forese”, que significa movimento, com o prefixo “eletro”, que indica o uso da eletricidade. Este termo foi criado por Michaelis, em 1909, para descrever a migração de coloides sob a influência de um campo elétrico. Hoje trata-se de uma técnica amplamente utilizada nas áreas de saúde e meio ambiente, tendo como objetivo a separação de moléculas.

Fonte: adaptado de: https://michaelis.uol.com.br/moderno-portugues/busca/portugues-brasileiro/eletroforese. Acesso em: 29 abr. 2024.

Com base no texto e nos fatores que interferem na taxa de migração das moléculas durante a eletroforese, assinale a alternativa correta:

ALTERNATIVAS

	Carga e forma das moléculas.
	Tamanho e carga das moléculas.
	Carga e solubilidade das moléculas.
	Solubilidade e forma das moléculas.
	Tamanho e solubilidade das moléculas.

3ª QUESTÃO

Desde o seu início, a reação em cadeia da polimerase (PCR) se tornou uma das ferramentas mais indispensáveis na biologia molecular para clonar pequenos fragmentos de DNA. No entanto, tradicionalmente as reações de PCR eram limitadas pelo tamanho máximo dos fragmentos amplificados.

A PCR de longo alcance aumentou o tamanho dos amplicons de 3–5 kb para mais de 30 kb, modificando as polimerases. Esses avanços técnicos trouxeram a velocidade e a simplicidade da PCR para o mapeamento e sequenciamento genômico e facilitaram os estudos em genética molecular. Quando combinada com o sequenciamento, a PCR de longo alcance pode atingir maior sensibilidade e fornecer uma ferramenta mais rápida e econômica para detectar variações genéticas.

Jia, H., Guo, Y., Zhao, W. et al. Long-range PCR in next-generation sequencing: comparison of six enzymes and evaluation on the MiSeq sequencer. Sci Rep 4, 5737 (2014).

Considerando as informações apresentadas e os conhecimentos adquiridos em aula e no livro didático, sobre PCR, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas.

I. A reação de PCR dispensa o uso de uma enzima termoestável como a Taq polimerase, visto que as variações de temperatura do termociclador não afetam a estabilidade das fitas de DNA durante os ciclos de amplificação.

PORQUE

II. A Taq polimerase, derivada de bactérias termofílicas, é essencial para a PCR porque mantém sua atividade e integridade estrutural nas altas temperaturas da etapa de desnaturação, permitindo a síntese eficiente de novas fitas de DNA.

A respeito dessas asserções, assinale a opção correta:

ALTERNATIVAS

	As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa correta da I.
	As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa correta da I.
	A asserção I é uma proposição verdadeira, e a II é uma proposição falsa.
	A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
	As asserções I e II são proposições falsas.

4ª QUESTÃO

“A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) surgiu como uma técnica inovadora no campo da Biologia Molecular. Antes de seu advento, os testes sorológicos eram empregados principalmente para detecção de doenças. No entanto, esses testes não tinham a precisão e a conveniência da detecção de doenças em estágio inicial, uma lacuna que a PCR preencheu efetivamente com a identificação de biomarcadores. A PCR envolve uma série de ciclos repetitivos em temperaturas variadas, resultando na produção de milhões de cópias de uma molécula de DNA, conhecida como molde. Essa técnica provou ser fundamental na detecção de doenças como infecções do trato respiratório causadas por bactérias ou vírus”.

SÁNCHEZ-FLORES, Jesús Enrique et al. An affordable and simple method for DNA extraction from agarose suitable for downstream applications. Scientific Reports, v. 15, n. 1, 26 mar. 2025.

‌Em relação à técnica de PCR, assinale a alternativa correta:

ALTERNATIVAS

	Para que o isolamento e replicação do material genético ocorra na técnica de PCR, é necessário grandes quantidades material.
	O isolamento do material genético não precisa apresentar DNA íntegro, extraível de diversas fontes, podendo ser vivos, decompostos ou fósseis, amplificando, assim, as sequências de DNA por ciclos térmicos, facilitando análises moleculares.
	O sequenciamento por nanoporos é considerado uma tecnologia de segunda geração no NGS, propicia a leitura de longas sequências de DNA em tempo real com dispositivos portáteis, detectando variações na corrente iônica à medida que o DNA atravessa nanoporos.
	O Sequenciamento de Nova Geração (NGS) oferece um processamento rápido e em larga escala, sendo necessário, posteriormente, uma biblioteca de DNA para comparação das sequências amplificadas, cuja sequência é identificada pelas cores dos dNTPs que foram adicionados a cada sequência.
	O sequenciamento de Sanger é considerado o “padrão ouro” para determinação de sequências de DNA devido à sua alta precisão. Em pontos específicos do DNA, nucleotídeos modificados se anelam, interrompendo a síntese da cadeia complementar e gerando fragmentos de diferentes tamanhos, separados por eletroforese, revelando a sequência nucleotídica.

5ª QUESTÃO

“Estudos detalhados da estrutura e da função de um gene em nível molecular necessitam de grandes quantidades do gene individual purificado. Uma variedade de técnicas, geralmente chamadas de tecnologia do DNA recombinante, são usadas na clonagem de DNA, que permite aos pesquisadores preparar grande número de moléculas de DNA idênticas. O DNA recombinante é simplesmente qualquer molécula de DNA composta por sequências derivadas de diferentes fontes”.

LODISH, Harvey. Biologia celular e molecular.

Considerando o texto apresentado e com os conhecimentos sobre a DNA Recombinante, avalie as afirmações a seguir:

I. A tecnologia do DNA recombinante permite a manipulação genética por meio da combinação de RNA de diferentes fontes, uma vez que os organismos apresentam o mesmo codigo genetico e as mesmas organelas para a sintese de proteínas.
II. A clonagem gênica é um dos principais exemplos da tecnologia do DNA recombinante, e envolve o isolamento e inserção de genes em vetores para produção de múltiplas cópias.
III. O processo de clonagem gênica requer a escolha de todo o genoma do organismo alvo, o isolamento do seu material genético, seleção de vetores de clonagem adequados e o uso de enzimas de restrição e ligases para criar o DNA recombinante.
IV. A introdução do DNA recombinante em células hospedeiras, como bactérias, e a seleção de células transformadas são etapas cruciais para a obtenção de clones com o gene de interesse.
‌
É correto o que se afirma em:

ALTERNATIVAS

	I, apenas.
	II, apenas.
	I e IV, apenas.
	II e IV, apenas.
	I, II e III, apenas.

6ª QUESTÃO

A agência regulatória do Reino Unido se tornou a primeira no mundo a aprovar uma terapia genética que promete curar duas doenças que afetam as células sanguíneas. O novo tratamento contra a doença falciforme e a beta talassemia é pioneira no uso de uma ferramenta de edição genética conhecida como Crispr. As responsáveis pela técnica — as cientistas Emmanuelle Charpentier e Jennifer Doudna — ganharam o Prêmio Nobel em 2020. Este avanço é considerado revolucionário para as duas doenças hereditárias que acometem o sangue, ambas desencadeadas por erros no gene da hemoglobina (proteína responsável pelo transporte de oxigênio nas hemácias).

Anemia falciforme: terapia genética é esperança contra doença “invisível” que afeta dezenas de milhares de brasileiros. Disponível em: <https://www.bbc.com/portuguese/articles/c3g25e0w4z6o>. Acesso em: 15 abr. de 2024.

‌Considerando o texto apresentado e com os conhecimentos sobre a Clonagem Gênica, avalie as afirmações a seguir.

I. A técnica Crispr-CAS9 é inovadora, pois permite a inserção precisa da terapia gênica modificadora no material genético.
II. Um fragmento de RNA guia se alinha numa sequência alvo exata, pois foi projetado em complementaridade a partir da fita de DNA.
III. Guiado pelo RNA complementar, a enzima CAS-9 age cortando a fita dupla de DNA, que sofrerá ação dos mecanismos de reparo celular.
IV. O mecanismo de reparação HDR faz a reparação do DNA cortado por meio da inserção de nucleotídeos baseados em um DNA molde inserido.

‌É correto o que se afirma em:

ALTERNATIVAS

	I, apenas.
	II, apenas.
	I e IV, apenas.
	II e III, apenas.
	I, II e III.

7ª QUESTÃO

A terapia gênica é uma abordagem genética promissora que teve como objetivo inicial tratar doenças herdadas ou adquiridas com auxílio da substituição, ou modificação de genes alterados, ou ausentes, e pode ser definida como uma técnica para introduzir material genético para obter uma resposta terapêutica.

DOLINSKY, L. C. de. Engenharia Genética. Florianópolis–SC: Arqué, 2023.

Com relação às técnicas de terapia gênica, assinale a opção correta:

ALTERNATIVAS

	Na terapia gênica, o gene mutado é alvo de replicação.
	A terapia pode ser aplicada em qualquer célula do corpo, pois o vetor irá diferenciar a célula após a infecção.
	Podem ser utilizados vetores virais ou não virais, como partículas sintetizadas para carrear e transferir a informação de interesse.
	A terapia gênica é uma técnica utilizada há décadas, especialmente empregada no cruzamento de animais para a seleção de características de interesse.
	Para o sucesso da expressão do gene editado, o gene receptor precisa passar por fase de desnaturação, para abertura da dupla fita de DNA, seguida por anelamento e extensão.

8ª QUESTÃO

O publicitário Paulo Peregrino tinha um linfoma não Hodgkin – câncer que ataca os glóbulos brancos do sangue, também chamados de linfócitos – e estava prestes a ser encaminhado para cuidados paliativos, pois já havia se submetido a 45 quimioterapias nos últimos anos, sem que houvesse melhora do quadro. Ele foi, então, selecionado para um tratamento desenvolvido pelo Hemocentro de Ribeirão Preto e pelo CTC-USP (Centro de Terapia Celular da Universidade de São Paulo), em parceria com o Instituto Butantan. O método, chamado de CAR-T, envolve o redirecionamento da atividade natural de uma célula de defesa, chamada de célula T, utilizando a expressão do receptor de antígeno quimérico (CAR, na sigla em inglês).

Terapia que eliminou câncer de homem em 30 dias reprograma as células de defesa do corpo; entenda. Disponível em: <https://noticias.r7.com/saude/terapia-que-eliminou-cancer-de-homem-em-30-dias-reprograma-as-celulas-de-defesa-do-corpo-entenda-01062023/>. Acesso em: 11 abr. 2024.

Com base nos conhecimentos adquiridos no livro sobre terapia CAT-T, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas.

I. Na terapia com células CAR-T, após a infusão nos pacientes dos vetores retrovírus modificados com a proteína T, quando em contato com células cancerígenas, reconhecidas pela expressão da proteína alvo, se ligam a essa proteína.

PORQUE

II. O contato ativa as células tipos T projetados com a adição do receptor CAR, inseridos pelo vetor, levando à destruição das células cancerígenas pelo sistema imunológico.
‌
A respeito dessas asserções, assinale a opção correta:

ALTERNATIVAS

	As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa correta da I.
	As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa correta da I.
	A asserção I é uma proposição verdadeira, e a II é uma proposição falsa.
	A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
	As asserções I e II são proposições falsas.

9ª QUESTÃO

“Entretanto, uma separação bem-sucedida de proteínas e ácidos nucleicos pode ser obtida se a eletroforese, em vez de ser feita em solução líquida, for realizada em géis variados (suspensões semissólidas em água semelhantes à gelatina encontrada em sobremesas). A separação eletroforética de proteínas é mais comumente realizada em géis de poliacrilamida“.

LODISH, Harvey. Biologia celular e molecular.

Considerando a técnica de eletroforese de proteínas, assinale a opção correta:

ALTERNATIVAS

	A visualização das proteínas separadas pode ser feita por sondas.
	A eletroforese em gel de agarose é ideal para técnicas de alta resolução e alto peso molecular.
	A eletroforese de proteínas separa e analisa proteínas com base no tamanho da molécula apenas.
	SDS-PAGE é um gel de poliacrilamida desnaturante e separa proteínas por carga elétrica, pois utiliza um detergente catiônico que confere uma carga positiva às moléculas.
	SDS-PAGE é um gel de poliacrilamida desnaturante e separa proteínas por peso molecular, pois utiliza um detergente aniônico que confere uma carga negativa às moléculas.

10ª QUESTÃO

“As disciplinas científicas como química, ciência ambiental, análise farmacêutica, bioquímica e ciência forense basearam a maioria de seus resultados na detecção analítica. Assim, muitas aplicações, incluindo pesquisa científica, monitoramento ambiental, controle de qualidade de assistência médica e produtos farmacêuticos, dependem do processo de identificação e quantificação da presença de um analito específico (composto ou substância alvo) em uma amostra. Por esse motivo, uma grande variedade de métodos de detecção analítica foi desenvolvida desde o início do século XIX. Hoje em dia, as metodologias mais amplamente empregadas podem ser classificadas em diferentes categorias: técnicas cromatográficas e espectroscópicas, métodos de eletromigração, imunoensaios, métodos eletroquímicos e abordagens baseadas em biologia molecular. De acordo com a natureza do analito, sua faixa de concentração e a complexidade da matriz da amostra, entre outros fatores, a seleção de um método de detecção conveniente pode ser realizada. Atendendo aos métodos baseados em eletromigração, um dos mais populares é a técnica de eletroforese, que aplica um campo elétrico para separar partículas carregadas, como proteínas, ácidos nucleicos e carboidratos. Assim, vários dados podem ser obtidos a partir da eletroforese, pois ela fornece o tamanho, carga, componentes estruturais e abundância relativa de moléculas biológicas, particularmente proteínas e ácidos nucleicos”.

B. SANTAMARÍA et al. Comparative analysis of Electrophoresis and Interferometric Optical Detection Method for Molecular Weight Determination of Proteins. Heliyon, v. 10, n. 16, p. e35932–e35932, 1 ago. 2024.

Com base nos conhecimentos sobre a eletroforese, avalie as afirmações a seguir.

I. A eletroforese é uma técnica laboratorial utilizada para separar moléculas carregadas com base em suas propriedades de tamanho e carga elétrica.
II. Existem diferentes tipos de eletroforese, como a eletroforese em gel, capilar e em papel, tendo como particularidades as análises de DNA, proteínas e lipídios, sendo as últimas, análises mais demoradas, respectivamente.
III. O processo de eletroforese envolve a aplicação de um campo elétrico em um meio de suporte, como gel ou papel, que permite a migração das moléculas e sua separação em bandas visíveis.

É correto o que se afirma em:

ALTERNATIVAS

	I, apenas.
	II, apenas.
	I e II, apenas.
	I e III, apenas.
	I, II e III.

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